PCR анализаторын алдааг олж засварлах: байнга асуудаг асуултууд, шийдлийг байнга асуудаг

Полимераза гинжин урвал (PCR) анализаторууд нь генетик судалгаанд чухал хэрэгсэл бөгөөд генетикийн судалгаанд ДНХ-д чухал ач холбогдолтой хэрэгсэл юм. Гэсэн хэдий ч аливаа нарийн төвөгтэй төхөөрөмж шиг, PCR анализатор нь түүний гүйцэтгэлд нөлөөлдөг бэрхшээлтэй тулгарч болно. Энэ нийтлэл нь зарим нийтлэг асуултуудыг асуудагPCR анализаторАсуудлыг олж засварлаж, нийтлэг асуудлын талаар практик шийдлүүдийг өгдөг.

1. Миний PCR-ийн хариу үйлдэл нь яагаад сэтгэл хангалуун бус байна вэ?

Хэрэглэгчидтэй тулгардаг хамгийн түгээмэл бэрхшээлийн нэг нь зорилтот ДНХ-ийг өсгөх чадваргүй байх явдал юм. Үүнийг хэд хэдэн хүчин зүйлээр холбож болно.

Буруу праймерын загвар: Таны праймерууд зорилтот дарааллаар тодорхойлогддог эсэхийг шалгаарай. Програм хангамжийн хэрэгслийг ашиглан профайлын хэрэгслийг ашиглана уу.

Хангалттай загвар хангалтгүй байна ДНХ: Та хангалттай хэмжээний загварыг ашиглаж байгаа эсэхийг шалгана уу. Хэтэрхий бага байх болно.

Дээжэнд дарангуйлагч: Дээж дэх бохирдуулагч нь PCR урвалыг дарангуйлдаг. ДНХ-ийг цэвэршүүлэх эсвэл өөр олборлох аргыг ашиглан.

Шийдэл: Праймерын дизайныг шалгана уу, Загварын концентрацийг шалгаж, өөрийн дээжийг дарангуйлагч агуулаагүй эсэхийг шалгаарай.

2. Яагаад миний PCR бүтээгдэхүүн буруу хэмжээтэй вэ?

Хэрэв таны PCR-ийн бүтээгдэхүүний хэмжээ нь хүлээгдэж буй шиг биш бол хариу урвалын нөхцөл, найрлага, найрлагатай холбоотой асуудлыг илтгэж магадгүй юм.

Тодорхой бус байдал: Энэ праймер төлөвлөөгүй сайт руу холбож байвал энэ нь тохиолдож болно. Тэсэлгэвч гэх мэт хэрэгслийг ашиглан праймеруудын өвөрмөц байдлыг шалгана уу.

Буруу remealing температур: Хэрэв хор хөнөөлтэй температур хэт доогуур байвал тодорхойлогдоогүй байх болно. Градиент PCR-ээр шинэхэн температурыг оновчтой болгох.

Шийдэл: Primer-ийн өвөрмөц байдлыг баталгаажуулах, PCR бүтээгдэхүүний нарийвчлалыг сайжруулахын тулд remeering температурыг оновчтой болгох.

3. Миний PCR анализатор алдааны мессежийг харуулна. би юу хийх ёстой вэ?

PCR анализатор дээрх алдааны мессежүүд түгшүүртэй байж болно, гэхдээ тэд болзошгүй асуудлуудаас олон удаа асуудлыг өгдөг.

Тохируулгын асуудлууд: PCR анализаторыг зөв шалгаж байгаа эсэхийг шалгаарай. Тогтмол засвар үйлчилгээ, тохируулгын шалгалт нь үнэн зөв үр дүнг олж авахад маш чухал юм.

Програм хангамжийн бүлэг: Заримдаа, програм хангамжийн алдаанууд асуудал үүсгэж болно. Компьютерээ дахин эхлүүлээд програм хангамжийн шинэчлэлтүүдийг шалгана уу.

Шийдэл: Тодорхой алдааны кодыг ашиглан хэрэглэгчийн гарын авлагыг үзнэ үү. Тогтмол засвар үйлчилгээ нь олон асуудлаас урьдчилан сэргийлэх боломжтой.

4. Миний PCR-ийн хариу урвал яагаад нөлөөлдөг вэ?

Тохиромжгүй PCR үр дүн нь хэд хэдэн шалтгааны улмаас бухимдаж болно.

Реггентийн чанар: Бүх урвалжууд, фермент, буфс, буфс, DNTPS, DNTPS, DNPS, өндөр чанартай, өндөр чанартай. Хугацаа нь дууссан эсвэл бохирдсон урвалжууд нь хувьсах чадварыг үүсгэж болзошгүй юм.

Дулааны циклер тохируулга: Температур температурын тохиргоо нь PCR процессад нөлөөлж болно. Дулааны мөчлөгийн тохируулгыг тогтмол шалгаж байгаарай.

Шийдэл: Өндөр чанартай урвалж бодисыг ашиглан тууштай үр дүнг хангахын тулд дулааныг тогтмол хий.

5. PCR-ийн урвалын үр ашгийг хэрхэн сайжруулах вэ?

PCR урвалын үр ашгийг сайжруулах нь илүү өндөр ургац, илүү найдвартай үр дүнд хүргэдэг.

Урвалын нөхцөл байдлыг оновчтой болгох: Праймерын янз бүрийн концентраци, загвар, MGCL2-ийн янз бүрийн концентрацийг ашиглан туршилт. PCR-ийн хариу үйлдэл бүр нь оновчтой гүйцэтгэлд өвөрмөц нөхцлийг шаарддаг.

Өндөр үнэнч шударга бус ферментийг ашиглана уу: Хэрэв нарийвчлал нь чухал боллоо.

Шийдэл: Тодорхой PCR тохируулгын хамгийн сайн нөхцлийг олохын тулд оновчтой болгох туршилтыг хийх.

Дүгтгэнээр

Алдаа засах аPCR анализаторЗавсарлах ажил байж болно, гэхдээ нийтлэг бэрхшээл, шийдлүүдийг таны PCR туршлагаа мэдэгдэхүйц нэмэгдүүлж чадна. Эдгээр нийтлэг бэрхшээлийг шийдвэрлэх замаар судлаачид PCR үр дүнг сайжруулах, молекул биологийн програмд ​​найдвартай үр дүнг сайжруулах боломжтой. Тогтмол засвар үйлчилгээ, урвалж, урвалын нөхцөл байдлыг болгоомжтой сонгоход хүргэлтийн нөхцөл байдал нь амжилттай PCR шинжилгээнд анхаарлаа төвлөрүүлдэг.